El bromuro de etidio (BrEt) es un agente químico muy usado en técnicas de biología molecular para teñir nuestros geles de agarosa y poder apreciar nuestras bandas de ADN; ya sean de los productos de la extracción o de la PCR. Existen dos formas de teñir los geles: o bien remojando el gel de agarosa por 15 minutos en una bandeja con BrEt (0.5mg/L) después de haber hecho la electroforesis; o bien añadiendo el BrEt directamente al gel al momento de prepararlo. Con la primera evitamos contaminar nuestra cámara de electroforesis con BrEt y con la segunda evitamos exponernos a salpicaduras y otros accidentes que pueden ocurrir al hacer la tinción en bandeja.Se han dado cuenta que desde que entramos a un laboratorio de biología molecular nos tienen traumados con el BrEt... Cuidado que te salpique..., No lo Huelas¡¡¡..., usa 3 guantes¡¡¡..., no es por ese lado¡¡¡... si te cae en la piel te va a dar cáncer y te puedes morir... entre otras cosas más (acepto comentarios acerca de que les dicen para que tengan cuidado con el BrEt).
Si bien se han hecho una serie de estudios in vitro acerca de los efectos del BrEt sobre diferentes líneas celulares y sistemas embrionarios, encontrándose un potencial efecto carcinogénico, teratogénico, con capacidad de cambiar el marco de lectura de los genes, causando mutaciones genéticas y recombinaciones cromosómicas (asu¡ que miedo)... no se ha provisto de evidencia que demuestre un efecto genotóxico en organismos más complejos que simples líneas celulares y embriones, como son los ratones o monos; es más, hasta ahora no se ha demostrado un efecto carcinogénico en ningún animal.
Por muchos años el BrEt es administrado para el tratamiento de la enfermedad del sueño africana en el ganado, a una dosis de 1mg/kg vía subcutánea o intramuscular y no se ha reportado hasta la fecha algún tipo de complicación carcinogénica o tumoral en estos animales, así como tampoco defectos congénitos en las crías. Esto quiere decir que el BrEt es menos genotóxico de lo que presumían los estudios in vitro.En biología molecular usamos concentraciones de 0.5mg/L, unas 2000 veces menor que del 50% del dosage letal (LD50: Letal Dosage 50%) que es más de 2g/Kg -tanto para abosrción oral como cutánea. Para un investigador como yo, que pesa unos 50Kg aproximadamente, necesitaría tomar más de 200000L de la solución de tinción de BrEt para alcanzar el 50% de la dosis letal o lavarme las manos con 200000L de dicha solución, lo cual es imposible... son aproximadamente 50000 galones de BrEt para tinción, con esto podría llenar el tanque de 2000 automóviles.
Ya ven no hay que tenerle mucho miedo al BrEt, más miedo hay que tenerle al disque no tóxico SYBR, un tinte "seguro" para geles de electroforesis. Se han hecho estudios que han demostrado una mayor genotoxicidad del SYBR sobre ratones que el propio BrEt.
Así que desde hoy... todos a brindar con Bromuro de Etidio, para instaurar el Día del Amigo Biólogo, este 6to Sábado de Julio¡¡¡
3 comentarios:
hay quimicos mas tóxicos que el EtBr como el fenol en los laboratorios, pero evidentemente es dificil asociar la exposición a un químico en pequeñas dosis con el desarrollo del cancer, para lo cual necesitarias al menos 3 mutaciones acumulativas a lo largo de los años.
Quisiera saber que medidas existen para minimizar o reducir el riesgo peligroso de este compuesto, si existe un protocolo; si existe algun otro compuesto o reactivo que me remmplaze y que sea menos peligroso que este.
Hola Julio, entre las principales medidas de seguridad es tener un ambiente especial para la tinción de los geles, que debe estar equipado con papel filtro, carbon activado y bolsas de bioseguridad. Nada debe salir de esta habitación. También usar guantes de nitrilo ya que los de latex no protejen. Depués de usar los geles dejarlos remojar en una bandeja con carbón activado, si es posible en presencia de luz ya que esta inactiva al BrEt. Finalmente filtrar e incinerar.
El SYBR puede reemplazar al BrEt, o si tu laboratorio tiene plata, usar el Nanodrop para la cuantificación del ADN y la PCR en tiempo real para analizar los amplicones.
Finalmente esperar unos 15 años para ver si sale un tumor por ahí y ver si nuestras medidas de seguridad funcionaron.
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